طراحی واکنش زنجیرهای پلیمراز برای تشخیص مولکولی سالمونلا تیفی

نویسندگان

نرگس امینی

n. amini محمد سلیمانی

m. soleimani آرش قلیانچی لنگرودی

a. ghalyanchi langeroudi (*corresponding author), aja university of medical sciences, medical faculty, tehran, iran کیوان مجیدزاده

k. majidzadeh ایران، تهران، دانشگاه علوم پزشکی آجا، مرکز تحقیقات زیست فن آوری تسنیم (*نویسنده مسوول)

چکیده

سابقه و هدف: سالمونلا انتریکا سروتایپ تیفی، باکتری مولد بیماری تب تیفوئید میباشد که سالانه بیش از 16 میلیون نفر در جهان به آن مبتلا میشوند و حدود 600 هزار نفر نیز در اثر آن می میرند. روشهای کلاسیک تشخیص این بیماری اغلب وقتگیر میباشند و از حساسیت کافی برخوردار نیستند. هدف این مطالعه، ارائهی نوعی روش مولکولی واکنش زنجیرهای پلیمراز (pcr: polymerase chain reaction) برای تشخیص سریع و انجام اقدامهای درمانی- بهداشتی مناسب و به موقع است. مواد و روشها: در این مقاله تحقیقاتی ژن اختصاصی viab مربوط به باکتری سالمونلا تیفی، هدفگذاری و از نرمافزار generunner، برای طراحی پرایمرهای اختصاصی استفاده شد. واکنش pcr ژن فوق با استفاده از ژنوم باکتری استاندارد (ptcc 1609) انجام و ویژگی روش نیز با استفاده از ژنوم انواعی از نمونه های کنترل منفی تعیین گردید. به منظور ساخت کنترل مثبت، تعیین حساسیت و حد تشخیص، کلونینگ محصولات pcr در وکتور پلاسمیدی ptz57r/t انجام گرفت. یافته ها: الکتروفورز محصولات pcr، باندی به طول 441 جفتباز را برای ژن viab نشان داد. نمونه های کنترل منفی مورد استفاده هیچ باندی ایجاد نکردند. کلونینگ محصولات pcr در وکتور ptz57r/t با استفاده از pcr، هضم آنزیمی و تعیین ترادف تأیید گردید. بحث و نتیجه گیری: پرایمرهای طراحی شده برای ژن viab در این روش میتواند با حساسیتی حدود 19 کپی از ژنوم برای شناسایی این ارگانیسم بهکار رود و با ردیابی سریع و دقیق باکتری، از ایجاد عوارض پایدار و ناخواسته جلوگیری نماید.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

مقایسه دو روش واکنش زنجیرهای پلیمراز و کشت استاندارد برای تشخیص سالمونلا در شیر خام

باکتری سالمونلا از جمله باکتریهای بیماریزا است که میتواند در غذا و مواد اولیهحضور پیدا کند. وجود این باکتری در مواد غذایی علاوه بر ایجاد بیماری میتواندباعث افت کیفیت تولید و کاهش رشد اقتصادی کشور شود. در این مطالعه، تعداد 150 مخزن حمل شیر خام برای شناسایی و جداسازی باکتری سالمونلا در شیرخام، برای مقایسه روشهای واکنش زنجیرهای پلیمراز و کشت مورد آزمایش قرارگرفت. در این روش ابتدا شیر خام به روش اس...

متن کامل

مقایسه دو روش واکنش زنجیرهای پلیمراز و کشت استاندارد برای تشخیص سالمونلا در شیر خام

باکتری سالمونلا از جمله باکتریهای بیماریزا است که میتواند در غذا و مواد اولیهحضور پیدا کند. وجود این باکتری در مواد غذایی علاوه بر ایجاد بیماری میتواندباعث افت کیفیت تولید و کاهش رشد اقتصادی کشور شود. در این مطالعه، تعداد 150 مخزن حمل شیر خام برای شناسایی و جداسازی باکتری سالمونلا در شیرخام، برای مقایسه روشهای واکنش زنجیرهای پلیمراز و کشت مورد آزمایش قرارگرفت. در این روش ابتدا شیر خام به روش اس...

متن کامل

تشخیص سریع و اختصاصی سالمونلا تیفی موریوم با استفاده از روش واکنش زنجیره ای پلیمراز-الایزا (pcr-elisa)

هدف: سالمونلا تیفی موریوم یکی از بیماری زاهای مهم غذایی است که باعث ایجاد گاستروانتریت می شود. در این تحقیق روش pcr-elisa برای شناسایی سالمونلا تیفی موریوم به کار گرفته شده است. مواد و روش ها: ژن rfb، که مسئول بیوسنتز آنتی ژن o از لیپوپلی ساکارید باکتری است، به عنوان توالی هدف انتخاب گردید. آغازگرهای تعیین شده منجر به تکثیر قطعه 882 جفت بازی برای گونه سالمونلا تیفی موریوم شد. نمونه های غذایی آل...

متن کامل

طراحی آزمون زنجیرهای پلی مراز (PCR) جهت تشخیص مولکولی سریع Neisseria meningitidis

  سابقه و هدف: نایسریا مننژیتیدیس پاتوژن اختصاصی انسان و دومین عامل شایع مننژیت در جهان است. جهت شناسایی این باکتری از آزمون ‌ های سنتی مانند کشت مایع نخاعی استفاده می ‌ شود ولی از معایب این روش ‌ ها وقت گیر بودن است. هدف این مطالعه، تشخیص سریع این باکتری به روش واکنش زنجیره ‌ ای پلی مراز (PCR) با استفاده از ژن CrgA است.   مواد و روش ‌ ها: ژن اختصاصی، حفاظت شده و دارای ارزش تشخیصی CrgA جهت طراح...

متن کامل

تشخیص سریع مولکولی سالمونلا تیفی به روش PCR با استفاده از ژن invA در نمونه های مواد غذائی

مقدمه: به دلیل این که سالمونلا تیفی یک پاتوژن روده ای مهم و آلوده کننده آب و غذا می باشد، تشخیص سریع و دقیق آن در آب و مواد غذائی بسیار حائز اهمیت است. امروزه تشخیص سریع باکتری های بیماری زا با تکنیک های نوین در مواد غذایی از اهمیت زیادی برخوردار است. هدف از انجام این مطالعه جداسازی سالمونلا تیفی در مواد غذایی آلوده با روش PCR با استفاده از ژن invA بوده است. مواد و روش ها: بعد از استخراج DNA ب...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید


عنوان ژورنال:
annals of military and health science research

جلد ۸، شماره ۳، صفحات ۱۵۹-۱۶۵

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023